高效液相色譜儀的等強(qiáng)度洗脫和梯度洗脫系統(tǒng)高效液相色譜儀是一個(gè)強(qiáng)有力的分離分析工具。但是,作為洗脫用流動(dòng)相并不單純是一種溶劑,而由兩種或兩種以上的溶劑(或緩沖液)以不同百分比組合而成。例如:甲醇-水、乙腈-水、乙腈一磷酸緩沖液和己烷-乙酸乙酯等等,以不同百分比混合組成流動(dòng)相。如果在洗脫過程中溶劑的混合組成不變,就稱作等強(qiáng)度洗脫,即溶劑強(qiáng)度保持不變。如果在洗脫過程中溶劑的混合組成隨時(shí)間變化的,稱作梯度洗脫。依照溶劑強(qiáng)度隨時(shí)間變化的梯度洗脫技術(shù)在液相色譜中是十分有用的。不少難分離的物質(zhì)對(duì)以及極性相差較大的混合物需要依靠梯度洗脫得到分離。下圖示出三元溶劑梯度洗脫系統(tǒng)。
單臺(tái)高壓泵通過比例閥與三個(gè)溶劑貯器相連,按照預(yù)先設(shè)計(jì)的梯度程序由梯度程序儀按不同時(shí)間發(fā)出指令,通過閥驅(qū)動(dòng)器控制三個(gè)比例閥按不同的時(shí)間間隔開閉。換句話說,高壓泵從三個(gè)溶劑貯器的溶劑吸入量是隨比例閥開閉時(shí)間長短而不同,集中到混合器后構(gòu)成了混合溶劑強(qiáng)度隨時(shí)間變化的曲線,即梯度洗脫曲線。△t1,△t2和△t3分別代表三個(gè)比例閥的啟開時(shí)間間隔,如果泵的流速不變,則某一貯器內(nèi)溶劑抽提的百分?jǐn)?shù)如下式所示:
雙泵二元梯度洗脫系統(tǒng)(下圖)是通過高壓泵改變驅(qū)動(dòng)速度,使得兩種溶劑的吸入量隨時(shí)間而變化,經(jīng)過混合器,其混合溶劑強(qiáng)度隨時(shí)間而變化。此時(shí),某一貯器內(nèi)溶劑抽提的百分?jǐn)?shù)可由下式表示。
式中F1、F2為兩個(gè)高壓泵各自的流量。