磁式細胞分選器簡介

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磁式細胞分選器簡介
FCM雖然是分離復(fù)雜細胞群中特定細胞的有效方法,但也有細胞處理量小,含量低于10-4的痕量細胞不能分離,并且費用較高等不足之處。目前市場上出現(xiàn)T 一種稱為磁式細胞分選器(magnetic activated cell sorting , MACS)的裝置,可作為細胞分析的預(yù)富集手段或FCM替代產(chǎn)品,價格便宜,使用方便,適宜于小型實驗室配置使用。下圖分別是MACS的外形和分選工作原理。




  MACS的分離效果已經(jīng)得到了免疫熒光、PCR、FISH及FCM的確認(rèn),其原理是通過抗體對細胞膜表面抗原的特異性識別,將偶聯(lián)在抗體上的磁珠標(biāo)記在細胞上,再在外在磁場作用下以正選或負(fù)選方式選擇性地分離細胞。其分離策略可以敘述如下。  滴定儀| 密度計| 熱流計| 濃度計| 折射儀| 采樣儀|
  1 .磁珠標(biāo)記
  將帶有磁珠的抗體快速和目的細胞的特殊表面抗原結(jié)合上去。
  2 .過柱分離
  將處理過的細胞樣品流經(jīng)MACS分離柱,未經(jīng)標(biāo)記的細胞流出分離柱(負(fù)選),而標(biāo)記上磁珠的目的細胞則被外加磁場吸附在柱內(nèi)。
  3 .洗脫細胞
  撤去外加磁場洗脫收集柱內(nèi)的細胞,即為正選的目的細胞。
  此法的的特點及優(yōu)點是適應(yīng)細胞種類廣,既可用于收集高含量的細胞也可用于富集痕量細胞(如抗原特異的B細胞、母親血液中的胎兒細胞、外周血中的造血干細胞和血液中的腫瘤細胞等),分離純度可高達95%~99%,細胞處理量可高達109。而最大優(yōu)點是磁珠不會影響細胞活力。其原因是MACS磁珠直徑僅50nm,相當(dāng)于一個病毒粒子大小,只有真核細胞的百萬分之一。更為重要的是,MACS磁珠能形成穩(wěn)定的膠體溶液,在磁場中既不沉淀,也不聚合,而且作為磁珠成分的鐵氧化物和多糖能被細胞所降解,使細胞保持生理活性。細胞分離后磁珠一也無需去除。
  細胞分選可以是正選、負(fù)選或正負(fù)選結(jié)合。正選就是讓目的細胞帶上磁珠,直接分離而得,此法快速也相對省錢;負(fù)選就是讓非目的細胞帶上標(biāo)記,收集未標(biāo)記細胞。負(fù)選一般只在無適當(dāng)抗體或抗體會影響細胞時才采用。正負(fù)選結(jié)合方法適用于分離細胞數(shù)極少或含有與其他非目的細胞相同表面抗原的細胞。
發(fā)布人:2010/12/31 10:06:003463 發(fā)布時間:2010/12/31 10:06:00 此新聞已被瀏覽:3463次