超微量分光光度計(jì)的新選擇
摘要: 無(wú)需比色皿或毛細(xì)管等耗材,只要1ul樣品即可檢測(cè)核酸濃度和純度,細(xì)胞濁度,蛋白A280,BCA,Bradford檢測(cè),熒光檢測(cè),最近有哪些新選擇? 水分測(cè)定儀| 濁度計(jì)| 色度計(jì)| 粘度計(jì)| 折射計(jì)| 滴定儀| 密度計(jì)| 熱流計(jì)| 濃度計(jì)| 折射儀| 采樣儀|
檢測(cè)核酸或者蛋白樣品濃度是最常用的實(shí)驗(yàn)操縱之一,傳統(tǒng)比色皿體積大,需要稀釋較多樣品,造成珍貴的核酸蛋白樣品浪費(fèi),而且還要反復(fù)清洗比色皿,甚煩。好在有超微量分光光度計(jì)的出現(xiàn)。早在2004年生物通就已經(jīng)大力推薦過(guò)基因有限公司引進(jìn)的NanoDrop微量分光光度計(jì),這種技術(shù)利用微量液體張力牽引形成光通路,從而替換比色皿,極具創(chuàng)新性和實(shí)用性,并得到2004年年度產(chǎn)品儀器類的創(chuàng)新大獎(jiǎng)。這種首創(chuàng)無(wú)需比色皿稀釋,只要1ul樣品溶液即可直接檢測(cè)核酸/蛋白/或者細(xì)胞濃度的新型分光光度計(jì)很快在國(guó)內(nèi)科研用戶中得到非常熱烈的認(rèn)同。
并非僅僅是個(gè)概念。Nanodrop ND-1000的高吸收光檢測(cè)能力相當(dāng)50倍于傳統(tǒng)分光光度計(jì),使得多數(shù)樣本不需要稀釋即可進(jìn)行全光譜(220nm-750nm)檢測(cè),無(wú)需消耗品,即插即用無(wú)需預(yù)熱,操縱極為方便。可以進(jìn)行核酸定量和純度檢測(cè),蛋白A280檢測(cè),Bradford檢測(cè),蛋白BCA檢測(cè),細(xì)胞濁度檢測(cè)等多種紫外/可見(jiàn)光檢測(cè)。Nanodrop ND-1000令NanoDrop公司申明大振而迅速確立來(lái)其在超微量分光光度計(jì)市場(chǎng)的領(lǐng)導(dǎo)地位。
但是對(duì)于高通量實(shí)驗(yàn),不說(shuō)384孔,就是96孔,這么一個(gè)一個(gè)的加樣-檢測(cè)-清潔下來(lái),不累死也要頭暈眼花的。因此,順應(yīng)這種需求,NanoDrop公司又推出了NanoDrop ND-8000,可一次同時(shí)檢測(cè)1-8個(gè)樣本,使得檢測(cè)速度立即提升8倍----用8道排槍,只要6分鐘可以檢測(cè)96個(gè)樣品,而且體積非常緊湊----差未幾A4紙大。32x24cm)。設(shè)想看檢測(cè)96孔樣品的濃度----可以節(jié)省多少樣品,節(jié)省多少時(shí)間和清洗比色皿的精力阿!新技術(shù)真是令人喝彩!
Nanodrop延續(xù)這個(gè)設(shè)計(jì)理念到熒光信號(hào)檢測(cè),推出了ND-3300熒光分光光度計(jì)。這個(gè)體積只有一本字典大小(20x14x12cm)的儀器卻擁有強(qiáng)大的功能----3組LED(UV365,藍(lán)光470和白光500-650)覆蓋400-750nm全光譜熒光分析,不需更換濾光片,不論是自行研發(fā)或市售熒光染劑都可使用,如 PicoGreen、RiboGreen、Hoechst、FITC、Cy3-Alexa555、Cy5-Alexa647, quantum dots等等。只要1.5-2ul樣本量,不需比色皿或者毛細(xì)管,無(wú)需稀釋樣品,檢測(cè)發(fā)射光峰值波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度和±20nm相對(duì)熒光輸出,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。熒光范圍可達(dá)10的5次方(0.1nmM-1000nM),采用2048像素CCD檢測(cè),內(nèi)置濾光片往除395nm以下光波干擾,由于使用三組LED冷光源代替?zhèn)鹘y(tǒng)高能耗光源,NanoDrop ND-3300能耗超低----只需要電腦的USB接口供電,根本無(wú)需外置電源!
NanoDrop ND-3300并不能完全替換傳統(tǒng)掃描熒光分光光度計(jì),也不適合檢測(cè)濃度特別低的樣品,其檢測(cè)濃度下限是1pg/ul,不如酶標(biāo)儀和傳統(tǒng)熒光分光光度計(jì)。但是NanoDrop ND-3300能檢測(cè)樣品物質(zhì)量卻實(shí)在比酶標(biāo)儀和傳統(tǒng)熒光分光光度計(jì)小的多----以PicoGreen為例,ND-3300可以檢測(cè)少至2pg的DNA樣品(2ul,1ug/ul),酶標(biāo)儀/讀板機(jī)檢測(cè)下限50pgDNA樣品(濃度讀數(shù)下限以0.25pg/ul為例);傳統(tǒng)分光光度計(jì)下限則是25pgDNA樣品(濃度讀數(shù)下限0.025pg/ul為例)。所以生物通特別提示你留意“檢測(cè)濃度”和“檢測(cè)物質(zhì)量”是不同的概念哦。
NanoDrop在快速超微量樣品吸收光/熒光檢測(cè)領(lǐng)域帶來(lái)的令人線人一新的變革,新技術(shù)可令每個(gè)研究職員直接感受到技術(shù)進(jìn)步的愉悅,好用是很好用,這3臺(tái)儀器價(jià)格不菲。2007年10月賽默飛世爾(Thermofisher)公布收購(gòu)Nanodrop公司,并將其產(chǎn)品收回Thermofisher旗下。
現(xiàn)在我們又多了一個(gè)新選擇----GE Healthcare公司最新推出都NanoVue超微量分光光度計(jì)!這是一款非常輕易操縱的微量分光光度計(jì),可以用來(lái)精確檢測(cè)核酸、蛋白和細(xì)菌培養(yǎng)液的濃度。只要0.5-5l的樣品加在一種全新設(shè)計(jì)的樣品板上檢測(cè)即可直接得到結(jié)果。由于全新的疏水點(diǎn)樣表面使得樣品檢測(cè)完之后還可以用Tips直接回收樣品,假如不需要當(dāng)然也可以簡(jiǎn)單擦拭徹底清潔樣品板,減少樣品間交叉污染。檢測(cè)時(shí)間5秒之內(nèi)即可完成讀數(shù)、出峰識(shí)別和檢測(cè)峰確認(rèn)。檢測(cè)波長(zhǎng)范圍200nm-1100nm。核酸掃描的可視化功能使得可以檢測(cè)樣品中雜質(zhì)的存在,對(duì)于RNA樣品測(cè)定非常有用。Press-to-Read功能使得按下檢測(cè)鍵后才打開(kāi)光源檢測(cè),減少光源工作時(shí)間延長(zhǎng)光源使用壽命。整體光學(xué)結(jié)構(gòu)為固定化設(shè)計(jì),避免搬動(dòng)造成光路偏移。
NanoVue的設(shè)計(jì)上內(nèi)置了很多功能,方便使用者的工作----既然要簡(jiǎn)化操縱,當(dāng)然是越方便越好!比如,儀器內(nèi)置寡核苷酸引物的分析方法,只要鍵進(jìn)66堿基以下的寡核苷酸序列即可計(jì)算獲得轉(zhuǎn)換因子(ug/ml),分子量理論吸光度(AU/umol)和理論Tm值。內(nèi)置多種蛋白定量檢測(cè)方法,包括Bradford, BCA, Lowry, Biuret和直接紫外法,最多可支持27個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線并可以保存。此外,儀器可以自動(dòng)測(cè)定所需光徑也可手動(dòng)調(diào)教以滿足特殊要求?梢詥吸c(diǎn)校正或者多點(diǎn)校正、自選波長(zhǎng)測(cè)定目標(biāo)樣品濃度。大面積高分辨率液晶屏上可顯示所有結(jié)果,包括標(biāo)準(zhǔn)曲線波長(zhǎng)掃描圖像,處處體現(xiàn)方便用戶的宗旨。
GE Healthcare NanoVue | NanoDrop ND-1000 Spectrophotometer | NanoDrop ND-8000 Spectrophotometer |
NanoDrop ND-3300 Fluorospectrometer |
不需比色皿,毛細(xì)管或者其他樣品裝置,滴下樣品即可讀數(shù) 0.5-5ul樣本,精確測(cè)定少量體積樣品,節(jié)約珍貴樣本 不需特地稀釋樣品增加體積來(lái)滿足測(cè)定光路的要求 可進(jìn)行核酸定量,蛋白質(zhì)定量或者細(xì)胞濃度測(cè)定,并有對(duì)應(yīng)預(yù)設(shè)的方法 讀數(shù)顯示大而易讀,軟件使用簡(jiǎn)單直接,儀器快速預(yù)熱,全自動(dòng)自檢,無(wú)需外置電腦節(jié)約空間 數(shù)據(jù)輸出形式多樣,內(nèi)置打印機(jī)或者無(wú)線鏈接電腦打印機(jī)打印結(jié)果 波長(zhǎng)范圍:200-1100nm波長(zhǎng)校準(zhǔn):開(kāi)機(jī)后自動(dòng)進(jìn)行 波寬:5nm 波長(zhǎng)正確性2nm 波長(zhǎng)重現(xiàn)性0.5nm 吸光度正確性1%(257nm) 光源:長(zhǎng)壽命穩(wěn)態(tài)氙燈 檢測(cè)器種類:雙重CCD陣列 尺寸:26x39x10cm |
專利表面張力技術(shù) 全光譜紫外-可見(jiàn)光檢測(cè) (220-750nm) 適用于DNA,RNA,染料,蛋白質(zhì)(A280,BCA,Bradford等檢測(cè))和細(xì)胞微生物培養(yǎng)液OD值測(cè)定 1 ul 樣本 動(dòng)力學(xué)范圍寬: 多數(shù)樣本無(wú)需稀釋 無(wú)需比色皿或者毛細(xì)管耗材 檢測(cè)時(shí)間10秒 小體積: 20cm X 14cm 即插即用無(wú)需預(yù)熱 |
高通量,一次可同時(shí)檢測(cè)8個(gè)樣本 可檢測(cè)單個(gè)樣本 全光譜紫外-可見(jiàn)光檢測(cè) (220-750nm) 適用于DNA,RNA,染料,蛋白質(zhì)和細(xì)胞微生物培養(yǎng)液OD值測(cè)定 1 ul 樣本 動(dòng)力學(xué)范圍寬: 多數(shù)樣本無(wú)需稀釋 無(wú)需比色皿或者毛細(xì)管或其他耗材 檢測(cè)時(shí)間20秒 小體積:32cm X 24cm 即插即用無(wú)需預(yù) |
三組LED覆蓋熒光發(fā)射全光譜分析 (400-750nm) 可用于PicoGreen, RiboGreen, Hoechst, FITC, Cy3-Alexa555, Cy5-Alexa647和quantum dots 等各種核酸蛋白染料 1-2 ul 樣本量 高靈敏度:可檢測(cè)pg/ul 級(jí)dsDNA 熒光范圍可達(dá)105 多數(shù)樣本無(wú)需稀釋 無(wú)需比色皿無(wú)需毛細(xì)管等耗材 檢測(cè)時(shí)間10-15秒t 小體積: 20cm X 14cm USB供電無(wú)需外置電源 即插即用無(wú)需預(yù)熱 波長(zhǎng)精確度:1nm |