應(yīng)用酸度計測定稻谷脂肪酸值的方法探討

應(yīng)用酸度計測定稻谷脂肪酸值的方法探討
摘要：針對稻谷脂肪酸值測定過程中手工操作為主，終點判定時個人誤差大、重現(xiàn)性差的問題，采用酸度計對稻谷脂肪酸值 進行測定，結(jié)果表明，測定結(jié)果相對偏差較小，重復(fù)性、準(zhǔn)確性較好。 關(guān)鍵詞：稻谷；脂肪酸值；酸度計；酚酞；變色范圍 中圖分類號：TS210．1 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1003—6202(2007)07—0007—02 稻谷脂肪酸值是判定儲存稻谷質(zhì)量品質(zhì)的重要指標(biāo)。 “國糧發(fā)[2004]43號《關(guān)于印發(fā)稻谷和玉米儲存品質(zhì)判定規(guī) 則的通知》”中規(guī)定了稻谷脂肪酸值的測定方法。但在實際 的檢測工作中發(fā)現(xiàn)，由于稻谷本身的特性，稻谷試樣的提取 液中加入蒸餾水后，形成一種乳白色的膠體溶液，在滴定終 點時指示劑的顏色變化較難判斷。當(dāng)看到溶液顏色有明顯 變化時，特別是變化到判定規(guī)則描述的“滴定至微紅色，30 S 不消褪為止”時，早已過了滴定終點。若此時讀數(shù)，則會產(chǎn)生 較大的終點判斷誤差，從而導(dǎo)致測定結(jié)果的誤差。而用酸度 計根據(jù)滴定至等當(dāng)點時pH值突躍來確定終點比用指示劑顏 色變化來判定終點具有較好的測定重復(fù)性、準(zhǔn)確性 J，解決 了終點判定的問題。水分測定儀| 濁度計| 色度計| 粘度計| 折射計| 滴定儀| 密度計| 熱流計| 濃度計| 折射儀| 采樣儀|

1 原理 在室溫下用無水乙醇提取稻谷中的脂肪酸，以pH玻璃 電極為指示電極，飽和甘汞電極作參比電極，用酸度計指示 溶液的pH值，以標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鉀一95％ 乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定試 液，pH8．0為終點，根據(jù)氫氧化鉀溶液的用量計算試樣的脂 肪酸值。

2 試劑 無水乙醇，AR；不含CO 的蒸餾水：將蒸餾水燒沸，加蓋 冷卻；氫氧化鉀一95％ 乙醇(中性)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液： 0．010 21 mol／L；pH4．00標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(20％)；pH6．88標(biāo)準(zhǔn) 緩沖溶液(2o~c)。

3 儀器與設(shè)備 JJ一200型電子天平；HY一4A數(shù)顯調(diào)速多用振蕩器； CLS．JLG一1型礱谷機；FSJ—I型糧食試驗粉碎機；PHS一25 型酸度計；79—3型磁力攪拌器；具塞磨口錐形瓶：250 ml；移 液管：50．0 ml、25．0 ml；微量滴定管：5 ml，最小刻度為 0．02 mol／L；燒杯：150 ml；量筒：50 ml；比色管：50 ml；玻璃短 頸漏斗；中速定性濾紙。

4 酸度計的校準(zhǔn) 按照酸度計的使用說明，用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液校正酸度計， 使其處于工作狀態(tài)以備用；每次測定完畢后，將電極及磁力 攪拌子用濾紙吸干以備用。

5 樣品制備與處理 取混合均勻樣品，用實驗礱谷機脫殼。取混合均勻的糙 米約80 g，用試驗粉碎機粉碎，粉碎樣品充分混合后裝入磨 口瓶中備用。 稱取制備試樣10 g(精確到0．001 g)，于250 ml具塞磨 口瓶中，并用移液管準(zhǔn)確加入50．0 ml無水乙醇，置往返式振 蕩器上振搖10 min，振蕩頻率為100~．／min；靜置1～2 min， 在玻璃漏斗中放人折疊式濾紙過濾，并加蓋濾紙；棄去最初 幾滴濾液，收集濾液25 rrIl以上。

6 測定 精確移取25．0 ml濾液于150 ml燒杯中，加50 ml不含 CO 的蒸餾水，開動磁力攪拌器，用氫氧化鉀一95％ 乙醇(中 性)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至酸度計指示pH8．0，記下耗用的氫氧化 鉀一95％ 乙醇溶液體積�？瞻自囼炓�25．0 ml無水乙醇代替 上述樣品濾液進行試驗，并記下耗用的氫氧化鉀一95％ 乙醇 溶液體積。

7 結(jié)果與討論 采用本方法與《關(guān)于印發(fā)稻谷和玉米儲存品質(zhì)判定規(guī)則 的通知》附錄A中的方法對韶關(guān)市直屬糧食儲備庫收購的 2005年早秈稻進行檢測，每份試樣取2個平行樣進行測定， 以其算術(shù)平均值為測定結(jié)果。試驗數(shù)據(jù)見表1、表2。 表1 采用酸度計平行測定稻谷脂肪酸值 mg K0H／100 g 項目 —1———2————3——型 4 室 墼 5———6———7———8一平l 均值L￡L 14．2 14．4 14．8 15．1 14．6 15．0 15．2 14．9 14．8 0．6 0．4 0 0．3 0．2 0．2 0．4 0．1 2．2 測定結(jié)果 絕對偏差 表2 采用國糧發(fā)[2004]43號附錄A中方法 測定稻谷脂肪酸值 mg KOH／100 g 項目 — 警— 丁 絕對偏差0．5 0．3 0．2 0．1 0．2 0．3 0．7 0．6 平均值 14．9 2．9 y=0．891 5x+71．378 R =0．737 3 y-0．8,51 7x～46．423 R =0．534．9 0 100 2()0 300 4I 500 PPO活性／A(min．g)一’ 一方法二與方法三的相關(guān)性 I I-方法二與方法一的相關(guān)性 圖4 三種方法所測小麥PPO活性的相關(guān)分析 6oo 竺500 g 400 ≤ 300 薹zo0 2 o0 0 150 250 350 450 PPO活性／A(min．g)～’ 圖5 方法三3次重復(fù)間的相關(guān)性 PPO活性／A(min·g) 司紅起等：小麥多酚氧化酶活性檢測方法的比較分析／2007年靠7期 圖6 方法三與方法二的相關(guān)分析 ’ f 其粗酶液濃度太低和底物濃度較高也是造成所測吸光度值 低的原因。若用全麥粉計算粗酶液的濃度，則方法一中粗酶 液濃度為0．5÷5÷[1+(1+2)÷0．25]=0．008 g／ml，方法 二和方法三中粗酶液濃度為0．3÷7．5：0．04 g／ml，后者為 前者的5倍。方法一中底物濃度為0．1÷(1+2+0．25)= 0．03 mol／L，方法二和方法三底物濃度為0．O1 mol／L。底物 濃度與粗酶液濃度的比值，方法一是方法二和方法三的 15倍。方法二和方法三所測的小麥PPO活性品種間差異極 顯著，且重復(fù)性好，誤差小。方法二中所用的底物L(fēng)-DOPA 難溶于水，且試劑昂貴；方法三中所用的底物鄰苯二酚易溶 于水，且試劑價格遠(yuǎn)低于L-DOPA；方法三與方法二所測的小 麥PPO活性呈極顯著正相關(guān)。所以方法三是一種成本較低 的小麥PPO活性批量檢測方法。