目前檢測蛋白質(zhì)的主要方法
目前蛋白質(zhì)檢測主要有三種方法:凱氏定氮法、杜馬斯法、紅外法。
凱氏定氮法現(xiàn)在常常用來進(jìn)行食品行業(yè)中蛋白質(zhì)檢測,測量樣品中的總氮含量,然后依據(jù)氮含量來計(jì)算蛋白質(zhì)含量,這是目前的標(biāo)準(zhǔn)方法。 凱氏定氮方法始于1883年,這種方法在操作上并不是一種非常理想的檢測方法,但目前仍在使用的原因在于尚未有另外一種檢測方法來代替這種方法。這種方法耗時(shí),要花好幾個(gè)小時(shí)才能做一個(gè)樣品,而且用的化學(xué)試劑也是非常危險(xiǎn),需要用硫酸加熱到400度。 凱氏定氮法是目前國際通行的檢測方法,這也就意味著,只要你的產(chǎn)品通過了這種方法的檢測,就可以上市銷售,但產(chǎn)品實(shí)際質(zhì)量如何,有時(shí)并不能如實(shí)反應(yīng)出來轉(zhuǎn)速計(jì)| 水份計(jì)| 水份儀| 分析儀| 溶氧計(jì)| 電導(dǎo)度計(jì)| PH計(jì)| 酸堿計(jì)| 糖度計(jì)| 鹽度計(jì)| 酸堿度計(jì)| 電導(dǎo)計(jì)。
杜馬斯方法被認(rèn)為是有顯著進(jìn)步的一種方法,并取得了一些成功。本質(zhì)上,它將樣品進(jìn)行燃燒,測量釋放出來的氮,然后算出蛋白質(zhì)含量。因?yàn)槟阏谌紵@個(gè)樣品,你必須要處理在這個(gè)儀器里所有的燃燒物,這會引發(fā)一個(gè)保存問題,而且不能測量液體樣品和大的樣品量。樣品量越大,就會有越多的問題發(fā)生,這就迫使人們?yōu)榱苏_地操作儀器,而不得不檢測比他們希望檢測的更少的樣品量。
還有一種方法是紅外的方法,是一種表面測量方法。但紅外檢測方法的儀器需要經(jīng)常校準(zhǔn),且校準(zhǔn)需要大量的校準(zhǔn)試劑,除此之外,還需大量清洗劑,而且易受到樣品其它成份的影響。
以上幾種測量方法都不是直接測量真的蛋白質(zhì)的方法,凱氏定氮法和杜馬斯法都是測量總氮含量,根據(jù)總氮含量,通過換算,再轉(zhuǎn)化成蛋白質(zhì)含量。實(shí)踐證明已經(jīng)引起許多的問題。因?yàn)槌鞍踪|(zhì)以外的含氮化合物,在凱氏定氮過程中,被同樣消化成(NH4)2 SO4,造成蛋白值虛高,我們統(tǒng)稱這些化合物為非蛋白氮/或假蛋白氮(NPN)。